Лабораторни резултати: In-Situ-Hybridization (ISH)

2023 Автор: Wallace Forman | [email protected]. Последно модифициран: 2023-08-25 11:04

Лабораторни резултати: In-Situ-Hybridization (ISH)

In-situ хибридизация - наричана още FISH (флуоресцентна in-situ хибридизация) или CISH (хромоген-in-situ хибридизация) - е специална медико-диагностична процедура, при която се изследва генетичният материал на телесните клетки или тъкани. По-специално, с този метод на изследване промените в човешкия генетичен материал (ДНК) могат да се използват за изясняване на генетични, инфекциозни и туморни заболявания.

Основната област на приложение за in-situ хибридизация е по-нататъшната диагностична работа в контекста на вродени, генетични заболявания, вирусни инфекции на клетки и тъкани, злокачествени туморни заболявания, левкемия (злокачествени заболявания на кръвта и костния мозък) и злокачествени лимфоми (злокачествени заболявания на лимфната система).

навигация

• продължавай да четеш
• повече по темата
• Съвети, изтегляния и инструменти
• Каква е лабораторната процедура за in situ хибридизация (ISH)?
• Как работи FISH изпитът?
• За кои заболявания се извършва ISH изследване?

Каква е лабораторната процедура за in situ хибридизация (ISH)?

Хибридизацията на място е специална медицинска диагностична процедура, при която генетичният материал на телесните клетки или тъкани се изследва директно върху тези структури.

Основата на генетичния материал е специална, силно сложна и дълговерижна молекула:

"ДНК" (дезоксирибонуклеинова киселина)

При хората генетичният материал, изграден от двуверижна ДНК (две комплементарни нишки), се намира в ядрото на всички телесни клетки, при което всички телесни клетки на индивида имат идентичен генетичен материал. Освен това точният състав на индивидуалния генетичен състав на всеки човек е уникален - сравним с пръстовия отпечатък, който също е уникален за всеки човек.

По тази причина се нарича и генетичният материал

т. нар. „генетичен код“, тъй като, така да се каже, планът на всички телесни структури на човек се картографира, съхранява и впоследствие се наследява в тази форма в криптирана форма

В клетъчните ядра на клетките на тялото ДНК е в специален ред, известен като

• "Хромозоми" (наследствени тела) се нарича. Хромозомите винаги се появяват по двойки в клетките на човешкото тяло, като едната е наследена от майката, а другата от бащата. В този смисъл всички клетки на човешкото тяло съдържат общо 46 хромозоми - 22 двойки така наречените автозоми и една двойка така наречени полови хромозоми.

• Самите хромозоми се състоят до голяма степен от ДНК, като отделни участъци от ДНК последователността се наричат „гени“, при условие че им може да бъде възложена специфична функция по отношение на структурата и функцията на тялото. Извиква се сумата от всички гени

  "Геном" на човешкото същество

Използвайки лабораторния процес на in-situ хибридизация, определени области от генома могат да се визуализират директно в клетките и тъканите. Това означава, че генетичният материал (ДНК) се прави видим директно в ядрото на клетките и след това се изследва и оценява под микроскоп. Името на тази лабораторна процедура произлиза от този принцип:

„На място“означава „директно в конструкцията, която трябва да се изследва“

Как работи FISH изпитът?

Следните компоненти са необходими за извършване на хибридизация in-situ:

• подходящ тестов материал (клетъчни или тъканни проби),
• подходящо оборудване за подготовка на препаратите за ISH и
• система за откриване (система за микроскопия) за показване (осигуряване на видимост) на генетичния материал в клетъчните ядра.

След като материалът за изследване е получен, материалът от клетки или тъкани трябва да бъде обработен:

• Клетъчният материал се разпръсква тънко върху тънки стъкла (микроскопски стъкла).
• В случая на тъканни проби се използват техники за хистологична подготовка за получаване на проби с тънко сечение, които се прилагат и върху микроскопски диапозитиви.

След тези етапи на подготовка, препаратите са покрити с така наречените денатуриращи етапи за получаване на едноверижна ДНК

"Генни сонди" - това също са денатурирани, едноверижни ДНК последователности, които се прикрепят към целевите последователности (ако присъстват в тестовия материал) - с други думи: "хибридизирай"

За да могат впоследствие продуктите на хибридизацията да станат видими за оценката, ДНК сондите се маркират директно или индиректно със специални багрила. Що се отнася до багрилата, има

• от една страна флуоресцентно оцветяване, при което за оценка на съответните препарати трябва да се използват специални флуоресцентни микроскопи. По тази причина се нарича и този метод на оцветяване

  Обозначава флуоресценция in situ хибридизация (FISH)

• от друга страна, ДНК сондите също могат да бъдат оцветени с прости хромогени (багрила), а обикновен светлинен микроскоп е достатъчен за показване и оценка на препарати, направени по този начин. Тази техника се нарича

  Хромоген In Situ хибридизация (CISH)

За кои заболявания се извършва ISH изследване?

Основната област на приложение за in-situ хибридизация е допълнителното изясняване в рамките на

• вродени, генетични заболявания,
• Вирусни инфекции на клетки и тъкани,
• злокачествени туморни заболявания,
• Левкемия (злокачествени заболявания на кръвта и костния мозък) и
• злокачествен лимфом (злокачествено заболяване на лимфната система).

Тъй като клетъчни или тъканни проби се анализират като материал за изследване при in-situ хибридизация, тази лабораторна процедура може да се извършва само в подходящо оборудвани цитологични или хистологични лабораторни съоръжения.

За повече информация относно рака вижте Рак.